2007, 23(9):20-23.
摘要:
目的：用更为简便的蛋白提取方法提取小鼠肝脏蛋白，寻找四氧嘧啶导致小鼠肝脏损伤差异表达蛋白质，为四氧嘧啶损伤肝脏的机理研究提供理论基础，为保肝药物研究提供理论依据。方法：将小鼠随机分成正常组、模型组，给模型组腹腔注射四氧嘧啶，同时给正常组注射等量生理盐水；小鼠处死后对肝脏进行外观和组织学观察。采用不同浓度丙酮分级沉淀肝脏蛋白，用SDS-聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳（SDS-PAGE）实验寻找正常组和模型组的差异表达蛋白质，进一步以基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）检测差异蛋白的肽质量指纹，在蛋白质数据库中检索鉴定差异蛋白的种类。结论：正常组和模型组的水溶性总蛋白和非水溶性总蛋白均有差异表达的蛋白质分子。选取水溶性蛋白50%丙酮沉淀中某一差异蛋白条带进行肽指纹图谱鉴定，检索结果为一未命名蛋白质。
