摘要:
本文用气相色谱-质谱联用仪对胆固醇高温氧化物进行鉴定,采用硅胶柱色谱法对氧化物进行分离,并由MTT法检测其对大鼠肝细胞BRL的毒性。结果显示:胆固醇在高温下的主要氧化物有5种,分别为:7α-羟基胆固醇、7β-羟基胆固醇、5,6β-环氧基胆固醇、5,6α-环氧基胆固醇、7-酮基胆固醇。单因素实验表明在160 ℃下加热30 min可以产生最大量的胆固醇氧化物,并在此条件下对胆固醇氧化物进行制备。粗制品经过硅胶柱色谱洗脱收集,可得纯度约为90%的胆固醇氧化物(组成为:7α-羟基胆固醇9.96%、7β-羟基胆固醇23.24%、5,6 β-环氧基胆固醇15.34%、5,6α-环氧基胆固醇14.36%、7-酮基胆固醇26.77%、胆固醇3.12%、其它杂质7.21%)。MTT法实验结果表明纯化后的胆固醇氧化物在80 μg/mL浓度下对大鼠肝细胞BRL表现出显著毒性作用(p < 0.05),在100 μg/mL时,细胞活性仅有空白对照的7.49%,胆固醇氧化物的毒性机理有待进一步研究。